yleisyys
Immunofunktio on laboratoriotesti, joka mahdollistaa biologisessa näytteessä olevien gamma-globuliinien tunnistamisen ja tyypityksen.
Yksityiskohtaisemmin analyysin avulla voidaan tutkia - potilaan veressä tai virtsassa - immunoglobuliiniluokkia (IgA, IgG, IgM, IgE tai IgD) ja kevyen ketjun kappa- tai lambda- tyyppiä niiden spesifisen elektroforeettisen liikkuvuuden mukaan . Myöhemmin, jotta tunnistettaisiin, mikä gamma-globuliini on mukana, immunofunktio sisältää spesifisten antigeenien inokulaation fragmentille tai vastaavalle vasta - aineelle ( anti-immunoglobuliinin antiseerumit ): epäillyn muutoksen läsnäolo vahvistetaan muodostumalla saostuma, joka on näkyvissä paljaalla silmällä tai mikroskoopilla.
Tämä informaatio on erittäin tärkeä erityisesti plasmasolujen patologioiden (gammopatioiden tai plasman solujen dyskrasioiden) diagnosoimiseksi. Immunofunktio on erittäin hyödyllinen multippelin myelooman, Waldenströmin makroglobulinemian ja primaarisen amyloidoosin (jota kutsutaan myös kevytketjun amyloidoosiksi) arvioimiseksi ja seurannaksi.
Mikä
Immunofunktio (tai immunoelektroforeesi, lyhennetty myös lyhenteessä IFE ) on tekniikka, joka pystyy määrittämään, onko immunoglobuliinien (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) tai kevytketjun kappa- tai lambda-tyyppi ja mikä luokka on läsnä. potilaan veren seerumin ja virtsan ylijäämä tai vika.
Kappa- ja lambda-kevytketjut karakterisoivat monoklonaalisen komponentin eli vasta-aineet, joilla on sama identtinen kemiallinen rakenne.
Seerumi ja virtsan immunofunktio: milloin se on ilmoitettu?
Plasmacellular dysplasias tai gammopathies ovat heterogeeninen ryhmä häiriöitä, joilla on tuntematon etiologia, jolle on tunnusomaista:
- B-solukloonin suhteeton lisääntyminen;
- Läsnäolo immunoglobuliinityypin (tai sen polypeptidi-alayksikön) seerumissa ja / tai virtsassa, joka on rakenteellisesti ja elektroforeettisesti homogeeninen ( monoklonaalinen ).
Normaalisti plasman solujen dyskrasiat diagnosoidaan käyttämällä seerumin ja virtsan proteiinien elektroforeesia, jota seuraa seerumin immunofunktio (IFE).
Samanaikaisesti voidaan määrätä verikoe immunoglobuliinien kokonaispitoisuuden (IgG + IgM + IgA) mittaamiseksi.
Lisätietoja: Immunoglobuliinit - Mitä he ovat, miten ne mitataan ja viitearvot »Immunofixointi: perusperiaate
Immunofunktio on tutkimus, joka käsittää kaksi vaihetta (ensin elektroforeesi agaroosigeelissä, sitten immunosaostus tietyillä antiseerumeilla ).
Immunofunktion ensimmäinen vaihe on sama kuin proteiinien (tai protidogramman) ELEKTROORESISIN, joten on tarpeen muistaa joitakin käsitteitä:
- Elektroforeesi on laboratorioanalyysi, jonka avulla voidaan määrittää veren seerumissa tai muissa biologisissa näytteissä läsnä olevien proteiinien määrä ja paljastaa jokaisen fraktion osalta, onko laatuun liittyviä poikkeamia. Erityisesti tämä tutkimus mahdollistaa proteiinien erottamisen viideksi ryhmäksi: albumiini, alfa 1 -globuliini, alfa 2 -globuliini, beeta-globuliini ja gamma-globuliini ; jälkimmäisiä tutkitaan tarkemmin immunofunktiolla.
- Elektroforeesi on erotusmenetelmä, joka perustuu sähköisesti varautuneiden hiukkasten erilaiseen siirtonopeuteen liuoksen ja inertin tukiväliaineen avulla sähkövirran vaikutuksesta, joka on muodostettu tasavirralla. Käytännössä kokeessa hyödynnetään potilaan näytteessä olevien sähkövaraus- ja molekyylimassaa . Sähkökentän impulssina nämä makromolekyylit siirtyvät ja "ryhmä" tyypin mukaan reagoivat stressiin ominaisella tavalla. Tulos ( elektroforeettinen jäljitys ) koostuu erilaisista huipuista ja käyristä, joihin proteiinifraktiot vastaavat. Tavallisesti ensimmäinen huippu, korkeampi ja kapeampi, on albumiinin huippu; seurata, seuraamme globuliinipiikkejä, paljon alhaisempia kuin albumiini. Polussa muodostuvien piikkien amplitudin ja voimakkuuden lisääntyminen tai väheneminen ilmaisee proteiinien suuremman tai pienemmän läsnäolon kussakin luokassa; mitä enemmän proteiineja esiintyy kaistalla, sitä suurempi on vastaava piikki. Gamma-globuliinien tapauksessa, jos halutaan tietää kunkin eri luokan (IgA, IgM, IgG jne.) Määrä, on välttämätöntä käyttää yhtä annosta. Yleensä mitä enemmän gamma-globuliineja esiintyy kaistalla, sitä suurempi on vastaava piikki; korkeus vastaa tiettyyn luokkaan kuuluvien proteiinien kokonaismäärää.
IMMUNOFISSATION tarjoaa:
1) Agaroosigeelielektroforeesi : potilaan näyte (seerumi tai virtsa) kerrostetaan elektroforeettiselle nauhalle, eli siirtymiselle (tavallisesti agaroosigeeli). Käyttämällä sähkövirtaa, joka on muodostettu tasavirralla, saadaan erotus eri kaistoilla. Käytännössä jokainen seoksessa esiintyvä gamma-globuliinityyppi (ts. Potilasnäytteessä) siirtyy molekyylipainon ja sähkövaroituksen perusteella. Gamma-globuliinien erilainen elektroforeettinen liikkuvuus mahdollistaa niiden tunnistamisen (kukin niistä vastaa tiettyä kaistaa elektroforeettisessa polussa) ja havaita mahdolliset poikkeamat.
2) Immuunisaostus spesifisillä antiseerumeilla (kiinnitys) : spesifistä vasta-ainetta tai fragmenttia koskevat spesifiset antigeenit lisätään erikseen kullekin elektroforeettiselle nauhalle (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-light kappa tai anti-ketju) lambda-kevytketju). Jos läsnä on monoklonaalista proteiinia, antigeenin ja vastaavan vasta-aineen vuorovaikutus tuottaa kapean kaistan (tämä tarkoittaa, että tulos on positiivinen) ja saostuman muodostuminen, joka näkyy paljaalla silmällä tai mikroskoopilla. Lopuksi näyte käsitellään (ts. Pestään ja värjätään) proteiinien poistamiseksi, jotka eivät ole saostuneet, geelin kuivaamisen saamiseksi ja jatkamaan tulosten lukemista.
Miksi se toimii
Mikä on Immunofixation?
Seerumin immunofiointi on tutkimus, joka on tarkoitettu diagnosoimaan tai seuraamaan sairauksia, joille on tunnusomaista gamma-globuliinien muutos, varsinkin kun se koskee monoklonaalisen komponentin ( monoklonaalinen gammopatia ) tuotantoa.
Lisätietoja: Monoklonaaliset gammopatiat - Mitä ja mitkä ovat »Immunofunktio on käyttökelpoinen tapauksissa, joissa epäillään olevan plasman solujen dyskrasiaa, ja se on olennainen MIELOMAn (ja siihen liittyvien patologioiden) ja MGUS: n (lyhenne "monoklonaaliset gammopatiat, joilla on epävarmaa merkitystä") tutkimuksessa.
Tämä testi antaa meille myös mahdollisuuden arvioida Waldenströmin makroglobulinemiaa ja kevytketjuista amyloidoosia ( AL ).
Immunofiointi: milloin tutkimus tehdään?
Immuunifunktionoinnin indikaatio seuraa kliinisiä tai laboratoriokokeita, jotka herättävät epäilyksiä monoklonaalisten vasta-aineiden tai immunoglobuliinien muutoksista seerumissa tai virtsassa.
Esimerkiksi tämä koe sallii seroprotektiivisen tai virtsan elektroforeesin tuloksen syventämisen: kun elektroforeettisessa jäljityksessä gamma-globuliineja vastaavat vyöhykkeet poikkeavat normaalista, immunofunktio tunnistaa, mikä näistä proteiineista muuttuu määrällisesti ja laatu.
Yhteenvetona voidaan todeta, että seerumin immunofunktionaatiota voidaan määrätä:
- Siinä tapauksessa, että muut laboratoriokokeet antavat epänormaalin tuloksen puuttuvat tai pienemmät ja suuremmat määrät plasmaproteiineja normin suhteen;
- Kun epäillään sellaisten sairauksien esiintymistä, joille on ominaista monoklonaalisen komponentin tuotanto, kuten:
- Multippeli myelooma ja sen variantit;
- Waldenströmin makroglobulinemia;
- amyloidoosi;
- Kun potilaalla ilmenee oireita ja oireita, jotka viittaavat monoklonaalisen gammopatian tai multippelin myelooman esiintymiseen, kuten:
- Luukipu;
- anemia;
- Helppo väsymys;
- Toistuvat infektiot;
- Selittämättömät murtumat.
Jos kyseessä on multippeli myelooma, proteiinien elektroforeesi ja immunofunktio ovat huomattavan hyödyllisiä myös taudin etenemisen seuraamiseksi (seuranta).
Immunofixointi: missä näytteitä voidaan suorittaa?
Biologiset näytteet, jotka voidaan altistaa immunisoinnille, ovat pääasiassa:
- Seerumi (seerumin immuunifunktio);
- Virtsa (virtsan immuunitukitus);
- Alkoholi * (nesteimmunofikaatio).
* Huomautus : CSF tai aivo-selkäydinneste on neste, joka läpäisee ja suojaa aivoja, selkäydintä, kallon hermoja ja selkäydinjuuria.
Normaalit arvot
NEGATIIVINEN tulos seerumin ja virtsan immunofunktionaalisuudesta monoklonaalisille tai polyklonaalisille gamma-globuliineille pidetään normaalina .
Gamma-globuliinit
Gamma-globuliinit muodostavat 9-20% koko plasman proteiineista.
- Referenssiarvo Gamma-globuliini : 0, 9-1, 4 g / dl
Mitä tulee immunoglobuliinien kokonaispitoisuuteen ( IgG + IgM + IgA ), uskotaan, että arvot välillä 600 ja 2300 mg / dl ovat normaaleja.
- Vertailuluku Immunogobuliinit seerumissa :
- IgA : 90-400 mg / dl
- IgG : 800-1800 mg / dl
- IgM : 60-280 mg / dl
- IgD : 0, 3-0, 4 mg / dl
- IgE : 20-440 mg / dl
Huomautus : tentin viitejakso voi vaihdella hieman riippuen analyysilaboratoriossa käytetystä iästä, sukupuolesta ja instrumentoinnista. Tästä syystä on suositeltavaa tutustua suoraan raportissa lueteltuihin alueisiin. On myös muistettava, että yleislääkärin on arvioitava analyysien tulokset kokonaisuutena, joka tuntee potilaan sairaushistorian.
Korkeat arvot - syyt
Gamma-globuliinien kasvu voi olla:
- Lisäys vaikuttaa polyklonaaliseen, jos immunoglobuliinien tuotanto on heterogeeninen eli kaikki gamma-globuliinien komponentit, jotka on tuotettu tai jotka ovat peräisin erilaisista plasman soluista;
- Monoklonaalinen, kun gamma-globuliinit tuotetaan tai johdetaan plasman solujen yhdestä tyypistä (kloonista).
Polyklonaalisten gamma-globuliinien kasvu voi liittyä:
- Krooniset tulehdussairaudet;
- Nivelreuma;
- Systeeminen lupus erythematosus;
- Krooniset maksasairaudet (kuten hepatiitti ja kirroosi);
- Akuutit ja krooniset infektiot;
- Viimeaikaiset immunisaatiot;
- Jotkut kasvainsairaudet.
Monoklonaalisten gamma-globuliinien korkeat arvot voivat osoittaa, että:
- Jotkut kasvaimet ja krooniset tulehdukset;
- Moninkertainen myelooma;
- lymfooma;
- Waldenströmin makroglobulinemia.
Gamma-globuliinin ylimäärää kutsutaan hypergammaglobulinemiaksi, kun taas puute tunnetaan hypogammaglobulinemiana .
Alhaiset arvot - syyt
Gamma-globuliinien pelkistäminen voi osoittaa, että immuunijärjestelmän eri sairaudet ovat geneettisesti perusteltuja, mukaan lukien agammaglobulinemia tai sekundaarinen immuunipuutos (esim. AIDS, munuaisten vajaatoiminta, akuutti sepsis ja Cushingin oireyhtymä).
Gamma-globuliiniarvojen lasku voi riippua myös sytostaattisten lääkkeiden, immunosuppressiivien ja steroidien käytöstä.
Miten se suoritetaan
Seerumin immunofunktio
Seerumin immunofunktio sisältää yksinkertaisen veren vetämisen käsivarren laskimosta. Seerumi saadaan sentrifugoimalla biologinen näyte; tämä sallii itse asiassa erottaa soluja sisältävän fraktion (korpulaarinen osa) nestemäisestä verestä (plasmasta). Veren seerumissa ei ole hyytymistekijöitä (fibrinogeeni, tekijä VIII, tekijä V ja protrombiini).
Virtsan immunofunktio
Virtsan immuunifunktionaation suorittamiseksi on tarpeen kerätä pieni määrä virtsaa erityiseen steriiliin astiaan. Lääkäri ja laboratorio osoittavat, että näyte voidaan kerätä ilman tarkkaa ajoitusta ( satunnainen ) tai 24 tunnin kuluessa .
Alkoholin immunisointi
Analyysi vaatii pienen määrän aivo-selkäydinnesteitä ottamalla neula sisään selkäydinonteloon ( lannerangan ).
valmistelu
Immunofixation: miten valmistaudut tenttiin?
- Ennen verinäytteenottoa jotkut laboratoriot saattavat vaatia tarkkailemaan vähintään 10-12 tunnin nopeutta. Tänä aikana sallitaan pieni määrä vettä.
- Immunofunktio voidaan suorittaa virtsalla, joka on kerätty tiettynä ajankohtana (satunnainen) tai 24 tunnin aikana, joten on tarpeen saada sopivat steriilit astiat etukäteen.
- Sen sijaan, että liuoksen immuunifunktio on, ei erityistä valmistusta tarvita.
Mikä voi muuttaa tentin tulosta?
Jotkut lääkkeet voivat vaikuttaa immuunijärjestelmän tuloksiin, joten on suositeltavaa ilmoittaa lääkkeelle meneillään olevista lääkehoidoista.
Kuusi kuukautta ennen tutkimusta rokotteiden antaminen (immunisointi) ja lääkkeiden, kuten fenytoiinin, prokai- diamidin, oraalisten ehkäisyvalmisteiden, metadonin ja terapeuttisen gamma-globuliinin, käyttö voi lisätä immunoglobuliinien pitoisuutta. Muita lääkkeitä, jotka voivat muuttaa testituloksia, ovat kortikosteroidit, neomysiini, asetyylisalisyylihappo ja klooripromasiini.
Tulosten tulkinta
Immunifioinnin tulos arvioidaan yhdessä muiden analyysien tulosten kanssa. Havainnon tulkinta on yleislääkärin tai referenssin vastuuhenkilön vastuulla, joka voi tunnistaa ja verrata muutoksia, jotka vaikuttavat tiettyyn gamma-globuliiniin (esimerkiksi kaistaan, joka on samanaikainen immunoglobuliinien G kanssa) tiettyihin sairauksiin. Tämä arviointi vahvistaa tai tukee diagnostista hypoteesia: immunofunktio voi yleensä paljastaa normaalin gamma-globuliiniprofiilin tai tunnistaa monoklonaalisen proteiinin tai polyklonaalisen mallin .
Kun tauti on määritelty, immunofunktio voidaan suorittaa seuraaville:
- Seuraa tautia ajan mittaan ja seuraa sen kulkua (seuranta);
- Tarkista terapeuttisen protokollan tehokkuus .
Hyödyt ja haitat Immunofixation
Proteiinielektroforeesiin verrattuna immunofunktio:
- Se on nopeampi : immunisaation tulokset saadaan yleensä kolmen tunnin kuluessa;
- Se on herkempää (vaikkakin hieman): immunofunktio voi paljastaa immunoglobuliinin, joka on suljettu pois proteiinielektroforeesista, erityisesti alhaisissa pitoisuuksissa (alle 1 gramma / litra).
Lisäksi immunofunktio:
- Se voidaan osittain automatisoida ;
- Se on helposti luettavissa ja tulkittavissa .
Immunifunktio on kuitenkin kalliimpaa kuin proteiinielektroforeesi ja sallii vain gamma-globuliinianalyysin .
Normaali tulos
Immunixoinnissa normaali polku sisältää:
- Kaista, joka on sama tummemman immunoglobuliinin G ( IgG ) kanssa;
- Kaista, joka vastaa kevyintä immunoglobuliinia A ( IgA );
- Immunoglobuliinin M ( IgM ) kaistan puuttuminen;
- Kappa- bändi on tiheämpi kuin lambda (kevytketju), suhteessa 2: 1.
Normaaleissa tuloksissa nauhat ovat suuria ja väritiheys vähenee asteittain ja yhtenäisesti immunoelektroforeesiliuskan reunoja kohti.
Polyklonaaliset gamma-globuliinit
Joissakin tapauksissa kaikki immunofunktiovyöhykkeet on tasaisesti peitetty samassa määrin. Tämä malli edustaa polyklonaalisten immunoglobuliinien läsnäoloa. Myös tässä tapauksessa nauhat ovat leveitä ja siirtyminen immunoelektroforeettisen nauhan reunoille on asteittainen. IgM-nauha - yleensä poissa - on leveä.
Monoklonaaliset gamma-globiinit
Kun kapea kaista, jossa on terävät reunat, voidaan tunnistaa immunofunktion reitillä, se tarkoittaa, että monoklonaalisten komponenttien etsiminen on positiivista .
Monoklonaalisen immunoglobuliinin tunnistaminen on hyödyllistä seuraavien tilojen diagnosoinnissa :
- Monoklonaalinen gammopatia, jolla ei ole merkitystä (MGUS);
- Moninkertainen myelooma;
- Waldenstromin makroglobulinemia;
- Amyloidoosi.
Lisäksi immunofunktiota voidaan käyttää plasman solujen dyskrasioiden hoitoon (esim. Multippeli myelooma ja Waldenstromin makroglobulinemia). Jos monoklonaalisen proteiinin taso pienenee tai ei ole havaittavissa kemoterapian jälkeen, se voi viitata hoitovasteeseen . Sen sijaan hoidosta huolimatta jatkuva monoklonaalinen proteiini on merkki tulehdussairaudesta .
Huomaa . Negatiivinen immunofunktionaalinen tulos ei aina sulje pois plasman solujen dyskrasiaa. Esimerkiksi ei-erittyvä multippeli myelooma tai oligosek- torio voi antaa negatiivisia tuloksia sekä virtsassa että seerumissa. Siksi, jos diagnostinen epäilys gammopatiasta on edelleen korkea, Kappa / Lambda Libere -valoketjujen ( K / L-suhde ) suhde määritetään .
Multippeliskleroosin immunisointi ja diagnoosi
Aivo-selkäydinnesteen (neste) immuunifunktio on määrätty, kun lääkäri epäilee multippeliskleroosin esiintymistä. Tässä tapauksessa määritetty polku on ominaista, koska se korostaa niin sanottujen oligoklonaalisten kaistojen läsnäoloa. Tulos raportoidaan laboratorion raportissa positiivisena . Olisi pidettävä mielessä, että kaistoja ei normaalisti havaita seerumin immuunisuojauksessa, koska ne korreloivat intratekaalisten gamma-globuliinien tuotantoon .
On kuitenkin huomattava, että tämä havainto ei välttämättä vahvista diagnoosia, koska muut olosuhteet voivat esiintyä oligoklonaalisten nauhojen kanssa aivo-selkäydinnesteessä.
Toisin sanoen, oligoklonaalisten nauhojen, joissa on immuunifunktionaalinen liuos, tunnistaminen on erittäin hyödyllistä multippeliskleroosin diagnoosin tukemiseksi, mutta se on vahvistettava muilla tutkimuksilla . Muita olosuhteita, jotka voivat saada tämän tuloksen, ovat keskushermostoon liittyvät tulehdukset, mukaan lukien: HIV: hen liittyvä enkefaliitti, neurosyfilis, neurosarkoidoosi, Lymen meningoentsefaliitti, CNS-maligniteetit, optinen neuromyeliitti ja poikittainen myeliitti.
